【摘要】

慢性腎臟病(Chronic kidney disease，CKD)是在各種慢性腎臟疾病基礎(chǔ)上緩慢發(fā)生的腎功能減退直至衰竭的臨床常見病，約有10%～16%的成年人患有不同程度的CKD，其發(fā)病率逐年上升，已逐漸成為全球性健康問題【1】。

從臨床角度出發(fā)，CKD 是由諸多因素引起腎功能逐步惡化，治療難度較大的疾病。目前的治療方法主要為積極治療原發(fā)病、控制相關(guān)危險因素以及延緩疾病的進展。

分子氫的生物學(xué)效應(yīng)迅速成為了近年的研究熱點，已有研究證實分子氫在多種疾病，包括腎臟疾病【2】中，具有抗氧化【3】、抗炎癥【4】、抗凋亡【5】等作用。

有研究表明，在H₂氣體處理的大鼠急性腎損傷(CIAKI)中，肌酐清除率升高。腎組織學(xué)分析顯示，H₂氣體吸入可改善蛋白鑄型和腎小管壞死的形成。分析表明，吸入H₂氣體可以顯著減少受損腎臟的腎細(xì)胞凋亡，降低Caspase 3的表達，以及氧化應(yīng)激標(biāo)記8-羥基脫氧鳥苷的表達。結(jié)果表明H₂氣體吸入可通過減輕腎細(xì)胞凋亡和氧化應(yīng)激，改善 CIAKI 的嚴(yán)重程度【6】。

因此，基于分子氫在基礎(chǔ)及臨床研究中顯示的安全有效性，針對應(yīng)用分子氫治療CKD 的臨床試驗值得期待。

【第一章 氫氣在腎臟疾病中的作用】

1、藥物誘導(dǎo)的腎毒性

順鉑是一種應(yīng)用廣泛的抗癌藥物，對多種腫瘤都有治療作用，例如頭部腫瘤、頸部腫瘤、睪丸癌、卵巢癌、乳腺癌和肺癌等【7】。然而，順鉑主要不良反應(yīng)為急性腎損傷，且這一不良反應(yīng)限制了25%～30%患者應(yīng)用其治療【8】。順鉑可通過降低還原型谷胱甘肽，抑制抗氧化活性，造成ROS積累，使腎臟脂質(zhì)過氧化等。國外研究團隊【9】應(yīng)用癌癥細(xì)胞系及患有癌癥的小鼠發(fā)現(xiàn)吸入1%的氫氣、飲用富氫液，可明顯改善順鉑引起的病死率和身體質(zhì)量下降，并緩解腎毒性，飲用富氫液可通過減少腎臟細(xì)胞的凋亡改善細(xì)胞變質(zhì)，并證明氫氣對順鉑介導(dǎo)的腎毒性具有保護作用。

因此，無論是氫氣或富氫液均可以改善患者在化療期間的生活質(zhì)量。隨后，有學(xué)者分別運用動態(tài)對比增強CT方法及血氧水平相關(guān)的磁共振方法證實，富氫液對順鉑介導(dǎo)的腎毒性具有保護作用【10】。此外，氫氣還能通過減輕動物腎皮質(zhì)內(nèi)的氧化損傷來降低慶大霉素誘導(dǎo)的腎毒性【11】。

2、腎缺血 I/R

腎臟血流量豐富，對缺血再灌注十分敏感，研究發(fā)現(xiàn)，【12】通過閉塞左腎動脈和切除右腎，建立大鼠腎I/R模型，腹腔注射富氫液，發(fā)現(xiàn)富氫液明顯減輕腎組織的間質(zhì)充血、水腫、炎癥、出血并抑制線粒體形態(tài)的改變，同時檢測到血清中8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)有所下降。

另一項實驗證明富氫液對腎I/R大鼠的保護性作用，主要通過降低腎組織中IL-1β、TNF-a、IL-6、8-OHdG、丙二醛(MDA)水平及提升組織SOD、CAT表達水平實現(xiàn)，提示富氫液可能通過減輕炎癥反應(yīng)和抑制氧化應(yīng)激對腎I/R起作用【13】。

此外，國內(nèi)學(xué)者【14】證實吸入2.5%氫氣可以降低腎I/R大鼠血肌酐、尿素氮水平及腎組織MDA水平，同時，可改善腎臟的病理變化。I/R是器官移植早期非免疫性損傷的重要原因，ROS 也參與了慢性移植性腎病后期腎間質(zhì)纖維化和腎小管萎縮的發(fā)生發(fā)展。在大鼠異種腎移植模型上證明，飲用富氫液可改善移植后的腎功能，減緩移植性腎病的進展，減輕氧化損傷并降低炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，最終提高了動物的存活率。

以上所有研究均為雙盲、安慰劑對照研究，并證明氫氣對腎I/R治療有效，所以推測是否臨床研究也會顯示出令人鼓舞的結(jié)果。I/R相關(guān)疾病的治療時間窗一般很短，因此，當(dāng)轉(zhuǎn)化為臨床應(yīng)用時，氫氣必須盡可能早的應(yīng)用于急性梗死患者。所以，在閉塞梗死相關(guān)動脈血流重建之前，確保氫氣能迅速到達缺血性區(qū)域至關(guān)重要。

3、腎結(jié)石

草酸鈣結(jié)石是腎結(jié)石中最常見的一種，其主要危險因素為高草酸尿【15】。腎結(jié)石的形成包括過度飽和、成核、生長、聚集、保留在腎小管5個階段。高草酸尿時，腎小管細(xì)胞的過氧化損傷對于草酸鈣結(jié)晶的成核與形成是很重要的因素，暴露于草酸鹽的腎小管上皮細(xì)胞ROS的產(chǎn)生顯著增加，隨之胞膜脂質(zhì)過氧化導(dǎo)致細(xì)胞損傷【16】。

有研究顯示，給予富氫液干預(yù)后，大鼠腎小管上皮細(xì)胞凋亡指數(shù)及腎組織MDA水平較模型組降低，腎組織SOD活性較模型組升高【17】。因此，富氫液能減輕高草酸尿造成的腎小管上皮細(xì)胞凋亡及氧化應(yīng)激水平，從而保護腎組織細(xì)胞，進而阻斷成石過程。應(yīng)用乙醛酸(草酸的前體)誘導(dǎo)的小鼠腎小管草酸鈣沉積模型，證明氫氣抑制腎結(jié)晶的形成和對腎小管上皮的保護作用是通過抑制氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)達到的【18】。

以上實驗為臨床應(yīng)用氫氣預(yù)防和治療腎結(jié)石提供了潛在的可能性。未來的研究應(yīng)該著重于氫氣對腎結(jié)石形成不同階段的影響及不同劑量的氫氣對腎結(jié)石的作用。

4、腎間質(zhì)纖維化

腎間質(zhì)纖維化是各種慢性進展性腎臟疾病不可避免的最終結(jié)局，也是導(dǎo)致終末期腎功能衰竭的重要原因之一。因此，積極探索腎間質(zhì)纖維化的發(fā)病機制和防御措施對改善腎臟病的預(yù)后至關(guān)重要。腎間質(zhì)纖維化的發(fā)生發(fā)展是一個復(fù)雜的病理過程，主要與氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡相關(guān)【19-21】。

我國學(xué)者【22】采用單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)復(fù)制腎間質(zhì)纖維化大鼠模型，腹腔注射富氫液，發(fā)現(xiàn)富氫液可明顯減輕腎間質(zhì)纖維化、巨噬細(xì)胞的滲出，降低腎損傷指數(shù)、凋亡指數(shù)、腎組織MDA水平，并可增加腎組織 SOD活性。富氫液減輕、延緩腎間質(zhì)纖維化、保護腎臟，為延緩慢性腎臟病的進展提供了新的治療靶點。

5、血液透析

多項研究表明，血液透析患者氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)的增強會導(dǎo)致心血管疾病和感染性疾病發(fā)生率增高，最終致使患者預(yù)后不良【23-25】。國外學(xué)者【26】運用溶解有高濃度氫氣的血液透析液開展了一項臨床試驗。21例對標(biāo)準(zhǔn)血液透析液反應(yīng)穩(wěn)定的受試者持續(xù)使用溶解有高濃度氫氣的血液透析液進行血液透析6個月，每周3次。在研究期間，沒有觀察到任何不良的臨床癥狀和體征。透析液中溶解的氫氣可以降低患者透析前后的收縮壓，并能顯著降低血漿單核細(xì)胞趨化蛋白及髓過氧化物酶活性。提示將氫氣加于透析液中能減輕炎性反應(yīng)，改善血壓的控制。

另一項臨床研究中，8例規(guī)律血液透析患者交替應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)透析液和溶解有高濃度氫氣的透析液進行透析治療，結(jié)果表明含氫透析液可降低血液透析患者的氧化應(yīng)激水平，且可能降低心血管疾病的發(fā)生率【27】。含氫透析液為尿毒癥的控制提供了一種新的治療方法。

【第二章 氫氣改善慢性腎臟病患者腎功能的臨床試驗】

海軍總醫(yī)院對2018年1月-2019年12月住院治療的診斷為CKD3-4期，共100例患者的對比研究，評估氫氣吸入對 CKD 患者腎功能和生活質(zhì)量的影響。

將患者隨機分為試驗組及對照組，試驗組患者按計劃吸入氫氣+基礎(chǔ)治療，吸入流量為 300ml/min， 時間為 6h/日，維持7天。對照組患者僅予以相應(yīng)基礎(chǔ)治療。收集患者的基本信息與臨床資料并分析試驗組與對照組的腎功能變化水平、生活質(zhì)量相關(guān)量表評分、實驗室指標(biāo)等結(jié)果。

歐洲五維量表在 CKD 人群中開展研究【28】，信度和效度良好，操作便利，VAS 評分大致可以反映 CKD 人群的生活質(zhì)量，所以在本研究中采用。

匹茲堡睡眠質(zhì)量指數(shù)(PSQI)是美國匹茲堡大學(xué)精神科醫(yī)生 Buysse 博士等人于1989 年編制的【29】。該研究指出，當(dāng) PSQI 得分臨界值為 5 分時，可正確選出 88.5%有睡眠障礙的患者(靈敏度 89.5%，特意度 86.5%)。檢索文獻發(fā)現(xiàn)臨床研究中多以PSQI>5 作為睡眠障礙的標(biāo)準(zhǔn)【30、31】，針對中國人群中文版 PSQI 的相關(guān)研究[32]也同樣以 PSQI>5 作為睡眠障礙的診斷標(biāo)準(zhǔn)，靈敏度可達 98%。

研究表明睡眠質(zhì)量差的患者更容易出現(xiàn)殘腎功能(RRF)降低，血清肌酐(Cr)、血清鎂(Mg)和血清鐵蛋白升高【32】。

統(tǒng)計顯示CKD 患者總體睡眠質(zhì)量較差，共 61 例(58.7%)出現(xiàn)睡眠障礙，總體歐洲五維量表生活質(zhì)量 VAS 評分為 61.68±12.26 分(滿分 100 分)，處于較低狀態(tài)。

表2-2 所示對照組治療前(入院第 1 天)血肌酐平均值為 207.26±13.89umol/L，經(jīng)過基礎(chǔ)治療后(入院第 7 天)血肌酐平均值為 205.76±13.66umol/L，血肌酐變化值(Δ Scr)為-(1.50±2.18)umol/L。而試驗組患者氫氣吸入+基礎(chǔ)治療前后血肌酐平均值分別為 228.04±12.16umol/L、218.20±12.04umol/L，ΔScr 為-(9.85±2.65)umol/L。同樣治療前后 eGFR、BUN、CysC 及 PSQI、VAS 評分均在表中列出。

相較于對照組，試驗組患者在一周的氫氣吸入治療后腎功能指標(biāo)(Scr、eGFR、BUN、CysC)及生活質(zhì) 量量表評分(PSQI、VAS)均有不同程度的改善，其中治療前后指標(biāo)變化值具有統(tǒng) 計學(xué)意義的是 ΔSc(r P=0.017, t=-2.434)、ΔeGFR(P=0.017, t=-2.172)，ΔPSQI(P=0.002, t=-3.208)、ΔVAS(P=0.044, t=-2.046)，ΔBUN(P=0.17, t=-1.376)、 ΔCysC(P=0.35, t=-0.935)雖然有改善的趨勢，但尚未達到統(tǒng)計學(xué)檢測水準(zhǔn)。

分析最終結(jié)果，驗證了氫氣對 CKD 患者腎功能的保護及生活質(zhì)量改善的作用。

【第三章 氫氣改善慢性腎臟病患者腎功能的機制研究】

我們把含有未成對電子的原子、 原子團或分子稱為自由基， 包括·OH、 O2-等。自由基是能量代謝的基礎(chǔ)，是維持機體活力的必要物質(zhì)，同時部分自由基也是細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)的重要分子，但自由基的異常增多會造成機體細(xì)胞的損傷【33】。

通常狀態(tài)下，機體內(nèi)自由基的產(chǎn)生和被清除維持在動態(tài)平衡的狀態(tài)。氧化應(yīng)激(oxidative stress，OS)的產(chǎn)生是由于機體內(nèi)氧化還原反應(yīng)的動態(tài)平衡被打破所造成的。通常發(fā)生于氧化反應(yīng)增強或抗氧化能力減弱時，動態(tài)平衡的天平向著氧化損傷的一邊傾斜。當(dāng)體內(nèi)絕大部分的自由基為氧自由基(reactive oxygen species，ROS)時，可造成蛋白、脂質(zhì)、DNA、RNA 以及細(xì)胞形態(tài)的氧化損傷，進而可能會導(dǎo)致生理機能紊亂【34】。

近年來國內(nèi)外研究逐漸發(fā)現(xiàn)氫氣在預(yù)防和治療應(yīng)用中具有作為抗氧化劑的潛力。氫氣可選擇性中和強氧化性的·OH、ONOO-等 ROS，而不影響其他介導(dǎo)正常生理過程的ROS，如 O2-、H₂O2 等，從而發(fā)揮保護細(xì)胞的作用。

氫氣可通過兩個途徑發(fā)揮抗氧化作用，一是直接與自由基發(fā)生中和反應(yīng);二是間接地作用于抗氧化系統(tǒng)，增加抗氧化酶的活性發(fā)揮抗氧化作用，保護機體免于氧化應(yīng)激所致的損傷。這些抗氧化酶包括超氧化歧化酶(SOD)、髓過氧化物酶(MPO)、過氧化氫酶等。研究表明，氫氣調(diào)控抗氧化酶的活性與表達水平的機制可能是通過轉(zhuǎn)錄因子核因子 E2 相關(guān)因子(Nrf2)信號通路而達成。Nrf2 可通過調(diào)控抗氧化酶的表達，影響機體的氧化應(yīng)激水平，是機體內(nèi)十分重要的抗氧化應(yīng)激轉(zhuǎn)錄因子【35】。

本研究將通過檢測參與試驗患者血液及尿液中的氧化應(yīng)激標(biāo)志物 GSH-PX、SOD、8-OHDG 及炎癥因子TNF-а、IL-6 水平的變化以觀察其作用的具體機制。

研究對象

本部分研究對象與第二章相同

觀察指標(biāo)

收集患者的一般資料以及檢測實驗室指標(biāo)：血液及尿液氧化應(yīng)激指標(biāo) ( SOD、GSH-PX、8-OHDG )、炎癥指標(biāo) ( TNF-α、白介素-6 ) 水平。

研究結(jié)果

1、血液氧化應(yīng)激及炎癥指標(biāo)

表 3-1 所示對照組治療前血清 SOD 平均值 72.51±1.61 U/mL，經(jīng)過基礎(chǔ)治療后 SOD 平均值為 72.96±1.60 U/mL，變化值(ΔSOD)為 0.45±0.78 U/mL。而試驗組患者氫氣吸入+基礎(chǔ)治療前后血肌酐平均值分別為 70.56±1.96 U/mL、76.12±2.18U/mL，ΔSOD 為 5.56±1.55U/mL。對照組治療前后血清 GSH-PX 平均值分別為 311.83±10.43 U/mL、320.63±9.52U/mL，變化值為 8.80±10.47 U/mL;試驗組治療前后血GSH-PX 平均值分別為 327.78±6.92 U/mL、371.34±11.51，ΔGSH-PX 為43.5±69.70U/mL。

對照組治療前后血清 8-OHDG 平均值分別為 0.40±0.10 ng/mL、 0.41±0.09ng/mL，Δ8-OHDG 為 0.01±0.06 ng/mL;試驗組治療前后血清 8-OHDG 平均值分別為0.56±0.14ng/mL、0.36±0.10ng/mL，變化值為-(0.20±0.07) ng/mL。對照組治療前后血清 TNF-a 平均值分別為 6.72±0.29 pg/mL、6.55±0.26 pg/mL，變化值為-(0.18±0.36)pg/mL;試驗組治療前后血清 TNF-a 平均值分別 7.27±0.43 pg/mL、5.54±0.51 pg/mL，變化值為-(1.73±0.64) pg/mL。對照組治療前后血清 IL-6 平均值分別為 2.50±0.45pg/m、2.48±0.37pg/m，變化值為-(0.03±0.30)pg/m;試驗組治療前后血清 IL-6 平均值分別為 4.00±0.71pg/m、2.59±0.49pg/m，變化值為-(1.40±0.52)pg/m。

氫氣干預(yù)后試驗組患者血清中氧化應(yīng)激指標(biāo)變化值(ΔSOD、ΔGSH-PX、Δ8-OHDG)較對照組明顯增加，差異均有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異;試驗組患者血清中炎癥指標(biāo)下降程度(ΔTNF-a、ΔIL-6)較對照組有明顯的統(tǒng)計學(xué)差異;這表明氫氣可以改善 CKD 患者的氧化應(yīng)激狀態(tài)，從而可能發(fā)揮保護作用。

2、尿液氧化應(yīng)激及炎癥指標(biāo)

表3-2 所示對照組治療前尿液中 SOD 平均值為 61.95±4.56 U/mL，治療后尿液 SOD 平均值為 64.14±4.36 U/mL，變化值(ΔSOD)為 2.19±1.72 U/mL。而試驗組治療前后尿液 SOD 平均值分別為 61.23±2.88 U/mL、70.03±2.88 U/mL，ΔSOD為 8.80±2.28 U/mL。對照組治療前后尿液 GSH-PX 平均值分別為 45.10±6.84 U/mL、48.30±7.35 U/mL，變化值為 3.21±2.34U/mL;試驗組治療前后尿液 GSH-PX 平均值分別為 48.14±9.39 U/mL、61.87±10.55U/mL，變化值為 13.73±4.20 U/mL。

對照組治療前后尿液 8-OHDG 平均值分別為 175.84±13.21 ng/mL、166.57±11.72 ng/mL，變化為-(9.27±6.89) ng/mL;試驗組治療前后尿液 8-OHDG 平均值分別為 174.76±9.16ng/mL、143.53±5.80 ng/mL，變化值為-(31.23±7.07) ng/mL。對照組治療前后尿液 TNF-a平均值分別為 12.18±1.96 pg/mL、11.34±1.62 pg/mL，變化值為-(0.83±0.96) pg/mL;試驗組治療前后尿液 TNF-a 平均值分別 11.77±1.41 pg/mL、9.87±1.02 pg/mL，變化值為-(1.90±0.93)pg/mL。對照組治療前后尿液 IL-6 平均值分別為 14.60±2.43pg/mL、13.04±2.10 pg/mL，變化值為-(1.56±1.84)pg/mL。試驗組治療前后尿液 IL-6 平均值分別為 15.03±3.46 pg/mL、12.86±3.11 pg/mL，變化值為-(2.17±3.02) pg/mL。

氫氣干預(yù)后，試驗組患者尿液中氧化應(yīng)激指標(biāo)變化值(ΔSOD、ΔGSH-PX、Δ8-OHDG)較對照組明顯增加，差異均有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異;試驗組患者尿液中炎癥指標(biāo)較對照組相比雖有下降趨勢，但變化值尚未達到統(tǒng)計學(xué)差異。

氧化應(yīng)激(Oxidative stress, OS)的含義是指機體內(nèi)活性氧的生成能力增加或清除能力降低所致的氧化與抗氧化作用失衡的一種狀態(tài)。CKD 患者存在明顯的 OS 和微炎癥狀態(tài)，而如前言所述氫氣恰好擁有著良好的選擇性抗氧化和抗炎癥作用，可清除氧自由基、提高抗氧化活性、減輕氧化作用所致的腎臟損傷。

本部分探究了氫氣吸入與 CKD 患者氧化應(yīng)激指標(biāo)及炎癥因子的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)氫氣吸入可以升高 CKD 患者血清及尿液中 SOD、GSH-PX 活力，降低血清及尿液 8-OHDG 水平，同時可以降低血清 TNF-a、IL-6 的表達，從而改善CKD 氧化應(yīng)激及微炎癥狀態(tài)，因此具有非常重要的臨床意義。這也為第二章研究中氫氣吸氣改善 CKD 患者腎臟功能及睡眠生活質(zhì)量提供了機制方面的有效解釋。同時也證實了氫氣可以在一定程度上緩解 CKD 患者的 OS 及微炎癥狀態(tài)，氫氣吸入可能是CKD患者抗氧化、抗炎癥治療的一種較為有效的方法 ，應(yīng)用前景十分可觀。

【專家點評】

全國首部《家用氫氣機》行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)起草委員會成員，北京金博智慧健康科技有限公司的創(chuàng)始人兼CEO——褚明禮老師認(rèn)為：

氫氣對慢性腎臟病患者的臨床試驗說明，氫氣吸入可以升高抗氧化酶的活力，降低氧化應(yīng)激水平，保護慢性腎炎患者腎功能，提高慢性腎炎患者生活質(zhì)量，是一種較為有效的治療方法 ，應(yīng)用前景十分廣闊。

【參考文獻】

【1】Levey AS，De Jong PE，Coresh J，et a1.The definition，classification，and prognosis of chronic kidney disease :a KDIGO Controversies Conference report.Kidney Int，20ll，80(1):17-28

【2】Chen J, Zhang H, Hu J, et al. Hydrogen-Rich Saline Alleviates Kidney Fibrosis Following AKI and Retains Klotho Expression. Frontiers in Pharmacology, 2017, 8

【3】Hayashida K, Sano M, Ohsawa I, et al. Inhalation of hydrogen gas reduces infarct size in the rat model of myocardial ischemia-reperfusion injury. Journal of Cardiac Failure, 2008,373(1):30-35.

【4】Zhang Y, Sun Q, He B, et al. Anti-inflammatory effect of hydrogen rich saline in a rat model of regional myocardial ischemia and reperfusion. International Journal of Cardiology, 2011, 148(1):91-95.

【5】CAI, Jianmei, et al. Hydrogen therapy reduces apoptosis in neonatal hypoxia–ischemia rat model. Neuroscience letters, 2008, 441.2: 167-172

【6】Homma K ,et al.Inhalation of Hydrogen Gas Is Beneficial for Preventing Contrast-Induced Acute Kidney Injury in Rats . Nephron Exp Nephrol 2014;128:116–122

【7】Ohta S.Recent progress toward hydrogen medicine: potential of molecular hydrogen for preventive and therapeutic applications[J].Curr Pharm Des,2011,17(22):2241-2252.

【8】Kim HJ,Park DJ,Kim JH,et al.Glutamine protects against cisplatin-induced nephrotoxicity by decreasing cisplatin accumulation[J].J pharmacol Sci,2015,127(1):117-126.

【9】Nakashima-Kamimura N,Mori T,Ohsawa I,et al.Molecular hydrogen alleviates nephrotoxicity induced by an ant-i cancer drug cisplatin without compromising antitumor activity in mice [J].Cancer Chemother Pharmacol,2009,64(4):753-761.

【10】Matsushita T,Kusakabe Y,Kitamura A,et al.Investigation of protective effect of hydrogen-rich water against cisplatininduced nephrotoxicity in rats using blood oxygenation leve-ldependent magnetic resonance imaging[J].Jpn J Radiol,2011,29(7):503-512.

【11】Matsushita T,Kusakabe Y,Kitamura A,et al.Protective effect of hydrogen-rich water against gentamicin-induced nephrotoxicity in rats using blood oxygenation leve-l dependent MR imaging[J].Magn Reson Med Sci,2011,10(3):169-176.

【12】Shingu C,Koga H,Hagiwara S,et al.Hydrogen-rich saline solution attenuates renal ischemia-reperfusion inj ury [J ].J Anesth,2010,24(4):569-574.

【13】Wang F,Yu G,Liu SY,et al.Hydrogen-rich saline protects against renal ischemia/reperfusion inj ury in rats [J ].J Surg Res,2011,167(2):33-344.

【14】Huang CS,Kawamura T,Toyoda Y,et al.Recent advances in hydrogen research as a therapeutic medical gas[J].Free Radic Res,2010,44(9):971-982.

【15】Okada A, Nomura S, Higashibata Y, et al.Successful formation of calcium oxalate crystal deposition in mouse kidney by intraabdominal glyoxylate inj ection[J].Urol Res,2007,35 (2):89-99.

【16】Byer K,Khan SR.Citrate provides protection against oxalate and calcium oxalate crystal induced oxidative damage to renal epithelium[J].J Urol,2005,173(2):640-646.

【17】譚桂梗,張士青.富氫水對高草酸尿所致大鼠腎小管上皮損傷的保護作用研究[J].上海交通大學(xué)學(xué)報:醫(yī)學(xué)版,2012,32(6): 732-735.

【18】Peng Z,Chen W,Wang L,et al.Inhalation of hydrogen gas ameliorates glyoxylate-induced calcium oxalate deposition and renal oxidative stress in mice[J].Int J Clin Exp Pathol,2015, 8(3):26 80-2689.

【19】Ning XH,Ge XF,Cui Y,et al.Ulinastatin inhibits unilateral ureteral obstruction-induced renal interstitial fibrosis in rats via transforming growthfactorβ(TGF-β)/Smad signalling pathways[J].Int Immunopharmacol,2013,15(2):406-413.

【20】Manucha W,Valles PG.Apoptosis modulated by oxidative stress and inflammation during obstructive nephropathy [J]. Inflamm Allergy Drug Targets,2012,11(4):303-312.

【21】Zhou TB,Qin YH,Lei FY,et al.Association of PAX2 with cell apoptosis in unilateral ureteral obstruction rats [J].Ren Fail,2013,3 4(2):194-202.

【22】Xu B, Zhang YB, Li ZZ, et al.Hydrogen-rich saline ameliorates renal inj ury induced by unilateral ureteral obstruction in rats[J].Int Immunopharmacol,2013,17 (2):447-452.

【23】Himmelfarb J,Stenvinkel P,Ikizler TA,et al.The elephant in uremia:oxidant stress as a unifying concept of cardiovascular disease in uremia[J].Kidney Int,2002,62(5):1524-1538.

【24】Sela S, Shurtz-Swirski R, Cohen-Mazor M, et al.Primed peripheral polymorphonuclear leukocyte:a culprit underlying chronic low-grade inflammation and systemic oxidative stress in chronic kidney disease[J].J Am Soc Nephrol,2005,1 6(8):2431-2438.

【25】 Deska-Sizien A, Malgorzewicz S, Dudziak M, et al. Cardiovascular risk in patients undergoing maintenance hemodialysis with Helixone membrane: amulticenter randomized study[J].Pol Arch Med Wewn,2014,124(11 ):593-598.

【26】Nakayama M,Nakano H,Hamada H,et al.A novel bioactive haemodialysis system using dissolved dihydrogen (H₂ ) produced by water electrolysis:a clinical trial[J].Nephrol Dial Transplant,2010,25(9):3026-3033.

【27】Terawaki H, Zhu WJ, Matsuyama Y, et al.Effect of a hydrogen (H₂ )-enriched solution on the albumin redox of hemodialysis patients [J].Hemodial Int,2014,18 (2 ):459-466.

【28】胡海燕, 諶衛(wèi), 郭志勇, 等. 中文版歐洲五維健康量表在慢性腎臟病患者中的信效度研究[J]. 中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志, 2012,13：690-693

【29】Buysse DJ, Reynolds CF 3rd, Monk TH, et al. The Pittsburgh Sleep Quality Index: a new instrument for psychiatric practice and research. Psychiatry Res. 1989;28(2):193-213

【30】Ishibashi Fukashi,Tavakoli Mitra,Thinning of Macular Neuroretinal Layers Contributes to Sleep Disorder in Patients With Type 2 Diabetes Without Clinical Evidences of Neuropathy and Retinopathy.[J] .Front Endocrinol (Lausanne), 2020, 11: 69.

【31】Zheng duJiang Jingjing,Li Yuqian, et al. Abnormal night sleep duration and poor sleep quality are independently and combinedly associated with elevated depressive symptoms in Chinese rural adults: Henan Rural Cohort.[J] .Sleep Med., 2019, 70: 71-78.

【32】Tsai P, Wang S, Wang M, et al. Psychometric evaluation of the Chinese version of the Pittsburgh sleep quality index (CPSQI) in primary insomnia and control subjects. Qual Life Res.2005;14(8):1943e52.

【33】Lai X, Chen W, Bian X, et al. Predictors of poor sleep quality and excessive daytime sleepiness in peritoneal dialysis patients[J]. Ren Fail, 2015,37:61-65

【34】孫學(xué)軍. 氫氣的選擇性抗氧化[J]. 生物物理學(xué)報, 2009(S1):123-124

【35】Iuchi K , Imoto A , Kamimura N , et al. Molecular hydrogen regulates gene expression by modifying the free radical chain reaction-dependent generation of oxidized phospholipid mediators[J].Scientific Reports, 2016, 6:18971