【導(dǎo)讀】

盡管近年來，肺癌在診斷和治療方面取得了突破，但它仍是全球第二大最常見的癌癥，也是癌癥相關(guān)死亡的主要原因。肺癌是一組異質(zhì)性疾病，可分為兩種主要的組織學(xué)類型，小細胞肺癌(SCLC)和非小細胞肺癌(NSCLC)特別是非小細胞肺癌(NSCLC)，約占85%。

目前化療仍然是肺癌治療的最常見手法，開發(fā)新的和更有效的治療組合是非常有意義的。吡非尼酮(以艾思瑞為主要代表藥物)是一種抗纖維化、抗炎和抗氧化藥物，已被多國批準(zhǔn)用于治療特發(fā)性肺纖維化，一些研究也顯示出其對幾種癌癥的治療潛力。然而，吡非尼酮對目前臨床使用的其他非小細胞肺癌化療藥物的增敏作用，研究數(shù)據(jù)較少。

【研究進展】

來自葡萄牙波爾圖大學(xué)的專家團隊，進行了一項旨在探究吡非尼酮是否能使非小細胞肺癌細胞對一線化療方案治療更敏感的研究，該成果發(fā)表在《International Journal of MolecularSciences》上。

研究人員利用腺癌A549、NCI-H322和大細胞癌NCI-H460三株人NSCLC細胞株中評價了紫杉醇聯(lián)合吡非尼酮對細胞生長的抑制作用。此外，研究人員進一步分析了聯(lián)合藥物治療對最敏感細胞株(NCI-H460)的細胞活力、細胞增殖、細胞周期譜、細胞死亡以及凋亡相關(guān)蛋白表達水平的影響。最后，研究人員在NCI-H460細胞中評估吡非尼酮對目前臨床使用的紫杉醇加卡鉑聯(lián)合用藥的增敏作用。

結(jié)果一：吡非尼酮可使NCI-H460細胞對紫杉醇敏感。

紫杉醇與吡非尼酮聯(lián)合治療對三種人類NSCLC細胞株細胞生長的影響采用SRB試驗進行了評估。

與各藥物單獨治療相比，5.7 nM紫杉醇聯(lián)合2.0 mM吡非尼酮聯(lián)合治療顯著降低了NCI-H460細胞的生長率。

結(jié)果二：紫杉醇與吡非尼酮聯(lián)合治療，有效降低NCI-H460細胞活性和增殖。

研究人員評估了紫杉醇聯(lián)合吡非尼酮聯(lián)合治療對NCI-H460細胞活力和增殖的影響，如下圖所示：

阿霉素在統(tǒng)計學(xué)上顯著降低了NCI-H460細胞的活力。紫杉醇或吡非尼酮處理的NCI-H460細胞顯著減少活細胞數(shù)量，而紫杉醇與吡非尼酮聯(lián)合治療比單獨治療更有效地降低了NCI-H460細胞活力。

熒光分析結(jié)果表明，單獨使用紫杉醇和吡非尼酮均可顯著降低NCI-H460增殖細胞的百分比，而與單用紫杉醇相比，在紫杉醇與吡非尼酮聯(lián)合治療后，增殖細胞的百分比進一步下降。

結(jié)果三：紫杉醇與吡非尼酮聯(lián)合治療會干擾NCI-H460細胞的細胞周期。

研究人員利用碘化丙啶(PI)染色后的流式細胞儀，探索吡非尼酮聯(lián)合化療藥對細胞增殖的影響是否與細胞周期譜的改變有關(guān)。將NCI-H460細胞用5.7nM紫杉醇和2.0mM吡非尼酮聯(lián)合處理48 h，每種藥物單獨使用，以最高濃度的載體(對照)和阿霉素(50nM，陽性對照)測試。

結(jié)果顯示，單用紫杉醇可導(dǎo)致細胞周期中GO/G1期細胞百分比顯著下降，同時亞G1期細胞數(shù)量增加。與此相反，當(dāng)NCI-H460細胞用2.0 mM吡非尼酮處理時，GO/G1期細胞百分比顯著增加，細胞周期S期細胞百分比顯著減少。

與單獨使用每種藥物的效果相比，紫杉醇與吡非尼酮聯(lián)合治療組的結(jié)果顯示顯著減少了G2 / M的細胞周期，這些結(jié)果表明紫杉醇與吡非尼酮聯(lián)合治療會干擾NCI-H460細胞的細胞周期。

結(jié)果四：紫杉醇與吡非尼酮聯(lián)合治療后NCI-H460細胞死亡的百分比顯著增加。

為了進一步證實聯(lián)合用藥對NCI-H460細胞死亡的影響，研究人員評估了紫杉醇與吡非尼酮單用或聯(lián)合用藥的影響。Western blot檢測細胞凋亡相關(guān)蛋白PARP、caspase-3的表達水平。

結(jié)果顯示，聯(lián)合用藥處理NCI-H460細胞時，總聚(adp -核糖)聚合酶1 (PARP-1)的表達水平顯著降低，同時PARP-1的表達水平升高。此外，在紫杉醇單獨或聯(lián)合藥物治療后，觀察到cleaved - caspase-3表達水平的增加。這些結(jié)果證實了我們之前的數(shù)據(jù)，即紫杉醇與吡非尼酮聯(lián)合治療后NCI-H460細胞死亡的百分比顯著增加。

結(jié)果五：吡非尼酮增敏NCI-H460細胞對紫杉醇加卡鉑聯(lián)合治療的作用。

研究人員通過測量細胞生長百分比來分析吡非尼酮增敏NCI-H460細胞對紫杉醇加卡鉑聯(lián)合治療的作用。

結(jié)果表明，與雙聯(lián)體(紫杉醇和卡鉑)相比，三聯(lián)用藥(紫杉醇和卡鉑+吡非尼酮)在統(tǒng)計學(xué)上顯著降低了NCI-H460細胞生長的率。

【研究結(jié)論】

目前紫杉醇、紫杉醇加卡鉑是治療非小細胞肺癌的一線方案，而以上數(shù)據(jù)表明，加用吡非尼酮可以使NCI-H460細胞對上述兩種一線治療方案更敏感。因此，一線化療方案加用吡非尼酮(以艾思瑞 為主要代表藥物)聯(lián)合治療非小細胞肺癌的進一步臨床研究結(jié)果值得期待。

【參考文獻】

Branco H, Oliveira J, et. Pirfenidone Sensitizes NCI-H460 Non-Small Cell Lung Cancer Cells to Paclitaxel and to a Combination of Paclitaxel with Carboplatin. Int J Mol Sci. 2022 Mar 26;23(7):3631.