【艾思瑞導讀】

慢性胰腺炎(Chronic pancreatitis，CP)是由基因、環(huán)境等因素引起的胰腺組織和功能不可逆改變的慢性炎癥性疾病，其病理改變主要包括腺泡細胞萎縮、慢性炎癥和胰腺間質(zhì)纖維化，其中胰腺纖維化是慢性胰腺炎的特征性病理改變。

【胰腺纖維化】

研究發(fā)現(xiàn)肝星狀細胞活化在肝纖維化中起著關鍵作用，而對肺纖維化的研究集中在巨噬細胞、中性粒細胞和淋巴細胞等炎癥細胞上。目前研究證實胰腺星狀細胞(pancreatic stellate cell，PSC)是胰腺纖維化的關鍵細胞，活化的PSC可分泌細胞外基質(zhì)促進纖維化發(fā)生、發(fā)展。

【動物實驗】

該實驗由來自美國阿拉巴馬大學伯明翰分校的研究團隊主持，選用6-8周齡、體重22.5-25g的C57BL/6J小鼠，飼養(yǎng)在無特定病原體的微隔離器下，利用多種蛋白誘導慢性胰腺炎模型。

然后，將小鼠分為吡非尼酮組和生理鹽水組，每日灌胃。在吡非尼酮治療后的第3、7、14和21天處死小鼠，評估小鼠的早期組織學、mRNA水平和免疫細胞的變化。

【實驗結(jié)果】

結(jié)果一：吡非尼酮可以逆轉(zhuǎn)纖維化并改善胰腺萎縮。

如上圖所示，在慢性胰腺炎(CP)模型建立后，開始給予吡非尼酮。

如上圖所示，胰腺與體重的比率顯示，吡非尼酮治療組的小鼠顯著增加，說明吡非尼酮改善了CP小鼠模型的胰腺萎縮。

如上圖所示，C組代表H&E切片的胰腺組織學以及組織學評分，顯示經(jīng)吡非尼酮治療后胰腺組織學恢復正常;D組代表經(jīng)天狼星紅染色及纖維化定量顯示，治療組胰腺膠原沉積減少，可見纖維化逆轉(zhuǎn);E組代表作為星形細胞激活的標記物，波形蛋白在吡非尼酮處理后的免疫組化表達下降。

結(jié)果二：吡非尼酮可以通過抑制M2巨噬細胞增殖來改善慢性胰腺炎。

M2巨噬細胞已被證明參與慢性胰腺炎(CP)的發(fā)病機制，因此，研究團隊評估了吡非尼酮對CP模型的巨噬細胞M2表型影響。

如上圖所示，研究團隊分別用IL-4和IL-13(各20 ng/ml)與吡非尼酮、及不加吡非尼酮處理巨噬細胞(0.5 mg/ml) 24小時。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，吡非尼酮降低了M2標記物和促纖維化IL-4的表達。

如上圖所示，為了進一步確定巨噬細胞在吡非尼酮有益作用中的關鍵作用，研究團隊在已建立的l-精氨酸慢性胰腺炎模型中，使用氯膦酸脂體誘導巨噬細胞。

如上圖所示，使用氯膦酸脂體誘導巨噬細胞后，吡非尼酮改善胰腺萎縮的有益作用消失，說明吡非尼酮可以通過抑制M2巨噬細胞增殖來改善慢性胰腺炎。

結(jié)果三：吡非尼酮降低胰腺星狀細胞的膠原分泌、細胞因子表達和纖維化標志物。

由于胰腺星狀細胞(pancreatic stellate cells, PSCs)在胰腺纖維化中起著關鍵作用，研究團隊接下來在體外評估吡非尼酮對胰腺纖維化的影響。

如上圖所示，吡非尼酮減少TGF-b激活的PSCs的膠原分泌(A);在蛋白水平上降低了PSCs中的a-SMA、波形蛋白和纖維連接蛋白的表達(B)。

如上圖所示，吡非尼酮可降低PSCs中纖維化標志物(膠原蛋白I、a-SMA、纖維連接蛋白、desmin等)和細胞因子(IL 1b、IL 6、IL 12a、IL 4和IL 18)的信息水平表達。

如上圖所示，在體外實驗中，使用的吡非尼酮劑量(0.5 mg/ml)，不影響PSCs的活力。

【研究結(jié)論】

通過模擬持續(xù)的胰腺刺激構(gòu)建慢性胰腺炎小鼠模型，進而證明吡非尼酮可以通過改變巨噬細胞極性，改善急性胰腺炎反復發(fā)作引起的持續(xù)性損傷，并且該研究還發(fā)現(xiàn)吡非尼酮可以逆轉(zhuǎn)胰腺纖維化和萎縮，降低胰腺纖維化的促進因子的表達水平。

基于吡非尼酮治療慢性胰腺炎的良好結(jié)果，相關的臨床前試驗已獲得了FDA的批準。未來，吡非尼酮(以艾思瑞為主要代表藥物)可能成為一種新的治療嚴重胰腺纖維化和胰腺萎縮的藥物，相關的后續(xù)研究和臨床研究結(jié)果值得期待!

【參考文獻】

林曦, 王丹, 胡良皞. 慢性胰腺炎胰腺纖維化機制研究進展[J]. 海軍軍醫(yī)大學學報, 2022, 43(3):6.

Bava E P, George J, Iyer S, et al. Pirfenidone ameliorates chronic pancreatitis in mouse models through immune and cytokine modulation[J]. Pancreatology, 2022, 22(5): 553-563.